腫瘤驅(qū)動基因突變和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性聯(lián)合檢測的方法、試劑盒和引物

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910256744.2 申請日 -
公開（公告）號 CN109825590A 公開（公告）日 2019-05-31
申請公布號 CN109825590A 申請公布日 2019-05-31
分類號 C12Q1/6886（2018.01）I; C12Q1/686（2018.01）I; C12N15/11（2006.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 蔡微菁; 嚴令華 申請（專利權）人 常州桐樹生物科技有限公司
代理機構 上海元好知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 常州桐樹生物科技有限公司
地址 213149 江蘇省常州市常州西太湖科技產(chǎn)業(yè)園長揚路9號B2棟2樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種腫瘤驅(qū)動基因突變和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性聯(lián)合檢測的方法、試劑盒和引物，該方法包含：步驟1，設計擴增引物，對目的片段進行PCR擴增，獲得含有單堿基突變檢測位點的第一PCR產(chǎn)物及含有MSI檢測位點的第二PCR產(chǎn)物；步驟2，對PCR產(chǎn)物進行純化；步驟3，設計用于單堿基延伸反應的第一引物和第二引物；第一引物針對單堿基突變位點進行設計；第二引物3’端的若干個連續(xù)堿基與所述第二PCR產(chǎn)物3’端的堿基互補，并且對第二引物的3’端進行修飾，以阻止第二引物的延伸；步驟4，對第一引物及所述第二PCR產(chǎn)物進行單堿基延伸；步驟5，對單堿基延伸反應產(chǎn)物進行純化；步驟6，對純化后的單堿基延伸反應產(chǎn)物進行聯(lián)合檢測。