產(chǎn)γ-氨基丁酸的重組菌及其構(gòu)建方法與應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510229161.2 申請日 -
公開（公告）號 CN104830886A 公開（公告）日 2015-08-12
申請公布號 CN104830886A 申請公布日 2015-08-12
分類號 C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P13/00(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 柯崇榕;黃建忠;陶勇;楊欣偉;胡美榮;饒煥新;曾文超 申請（專利權(quán)）人 福建力多利生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 關(guān)暢;任鳳華
地址 350117 福建省福州市大學城科技路1號福建師范大學旗山校區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了產(chǎn)γ-氨基丁酸的重組菌及其構(gòu)建方法與應(yīng)用。采用本發(fā)明的方法將谷氨酸脫羧酶B基因(gadB基因)通過表達載體pBAD/HisB導入到大腸桿菌突變株K12ΔgadABC中構(gòu)建的基因工程菌KG01阻斷了γ-氨基丁酸的降解途徑并且鈍化了谷氨酸：γ-氨基丁酸反向轉(zhuǎn)運蛋白對pH的敏感性，有效地減少了γ-氨基丁酸的降解提高了GABA的產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化效率。KG01菌株的轉(zhuǎn)化率不受pH變化的影響，而且GABA的產(chǎn)量最高，明顯高于K12ΔgabT菌株和K12菌株。以濃度為2M的谷氨酸為底物，KG01菌株連續(xù)轉(zhuǎn)化三次，每次的轉(zhuǎn)化率均在99％以上，產(chǎn)量均大于204g/L，底物殘留量低，便于下游結(jié)晶精制。采用本發(fā)明的方法構(gòu)建的基因工程菌生產(chǎn)γ-氨基丁酸，具有原料低廉，工藝簡單，生產(chǎn)效率高等優(yōu)點，具有良好的工業(yè)化應(yīng)用前景。