一種谷氨酸脫羧酶重組菌及其構建方法和應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811652655.1 申請日 -
公開（公告）號 CN111378611B 公開（公告）日 2022-02-22
申請公布號 CN111378611B 申請公布日 2022-02-22
分類號 C12N1/21（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/60（2006.01）I;C12N9/88（2006.01）I;C12P13/00（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N;CN 101054569 A,2007.10.17;CN 105296523 A,2016.02.03;CN 101945997 A,2011.01.12;CN 103484419 A,2014.01.01;CN 101063144 A,2007.10.31;JP S504294 A,1975.01.17;WO 2011137369 A1,2011.11.03 靳春鵬等.谷氨酸脫羧酶基因工程改造研究進展.《食品與發(fā)酵工業(yè)》.2016,第42卷（第12期）,;田靈芝等.一株重組大腸桿菌/pET-28a-lpgad 的構建及其高效生產 γ-氨基丁酸轉化條件的優(yōu)化.《生物工程學報》.2012,第28卷（第1期）,;Jingwei Zhang et al..Metabolic engineering of Escherichia coli for the biosynthesis of 2-pyrrolidone.《Metabolic Engineering Communications》.2015,第3卷;Haina Yuan et al..Identification of new glutamate decarboxylases from Streptomyces for efficient production of γ-aminobutyric acid in engineered Escherichia coli.《Journal of Biological Engineering》.2019,第13卷 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 占紀勛 申請（專利權）人 杭州唯鉑萊生物科技有限公司
代理機構 杭州創(chuàng)智卓英知識產權代理事務所（普通合伙） 代理人 鄭思思
地址 310000浙江省杭州市余杭區(qū)良渚街道七賢橋村（1幢）3樓301
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種谷氨酸脫羧酶重組菌，該重組菌為導入了谷氨酸脫羧酶基因的大腸桿菌，其中所述的谷氨酸脫羧酶基因為來源于弓形鏈霉菌NRRL 15443的StGAD、鏈霉菌MJ654?NF4的SsGAD或嗜鉻鏈霉菌ATCC 49982的ScGAD，其核苷酸序列如SEQ ID No：1?3所示。本發(fā)明采用弓形鏈霉菌NRRL 15443、鏈霉菌MJ654?NF4和嗜鉻鏈霉菌ATCC 49982作為菌株，通過PCR擴增技術從上述三種菌株的基因組上擴增得到了谷氨酸脫羧酶的編碼基因：SsGAD、StGAD、ScGAD，利用大腸桿菌E.coli BL21（DE3）作為宿主，成功構建了能夠高效表達谷氨酸脫羧酶的重組菌，該工程菌經歷至少10次的重復利用依然保持極高的轉化效率。本發(fā)明還提供了上述重組菌的構建方法及該重組菌在制備GABA的應用，上述方法生產易操作，易放大，穩(wěn)定性好，適于大規(guī)模工業(yè)化生產。