一種谷氨酸脫羧酶重組菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811652655.1 申請日 -
公開（公告）號 CN111378611A 公開（公告）日 2020-07-07
申請公布號 CN111378611A 申請公布日 2020-07-07
分類號 C12N1/21(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 占紀勛 申請（專利權(quán)）人 杭州唯鉑萊生物科技有限公司
代理機構(gòu) 杭州創(chuàng)智卓英知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 鄭思思
地址 310000浙江省杭州市余杭區(qū)良渚街道七賢橋村（1幢）3樓301
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種谷氨酸脫羧酶重組菌，該重組菌為導(dǎo)入了谷氨酸脫羧酶基因的大腸桿菌，其中所述的谷氨酸脫羧酶基因為來源于弓形鏈霉菌NRRL 15443的StGAD、鏈霉菌MJ654?NF4的SsGAD或嗜鉻鏈霉菌ATCC 49982的ScGAD，其核苷酸序列如SEQ ID No：1?3所示。本發(fā)明采用弓形鏈霉菌NRRL 15443、鏈霉菌MJ654?NF4和嗜鉻鏈霉菌ATCC 49982作為菌株，通過PCR擴增技術(shù)從上述三種菌株的基因組上擴增得到了谷氨酸脫羧酶的編碼基因：SsGAD、StGAD、ScGAD，利用大腸桿菌E.coli BL21(DE3)作為宿主，成功構(gòu)建了能夠高效表達谷氨酸脫羧酶的重組菌，該工程菌經(jīng)歷至少10次的重復(fù)利用依然保持極高的轉(zhuǎn)化效率。本發(fā)明還提供了上述重組菌的構(gòu)建方法及該重組菌在制備GABA的應(yīng)用，上述方法生產(chǎn)易操作，易放大，穩(wěn)定性好，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。??