一種在鏈霉菌中高效表達磷脂酶D的方法及重組鏈霉菌

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011640261.1 申請日 -
公開（公告）號 CN112575023A 公開（公告）日 2021-03-30
申請公布號 CN112575023A 申請公布日 2021-03-30
分類號 C12N9/16(2006.01)I;C12N15/76(2006.01)I;C12R1/465(2006.01)N;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/48(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱海華;王鋆坦;王小瑞;平洋;譚靜;張亞勛;周莉;王慧 申請（專利權(quán)）人 河南省商業(yè)科學研究所有限責任公司
代理機構(gòu) 成都弘毅天承知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 李穎
地址 450000河南省鄭州市金水區(qū)文化路87號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于基因工程領域，涉及一種在鏈霉菌中高效表達磷脂酶D的方法，步驟一，選擇磷脂酶D的異源高效表達宿主，步驟二，篩選磷脂酶D合成基因的最佳來源，步驟三，獲取鏈霉菌來源的磷脂酶D基因片段，步驟四，連接目的基因形成磷脂酶D重組質(zhì)粒，步驟五，重組質(zhì)粒接合轉(zhuǎn)移至宿主菌，步驟六，重組菌株的發(fā)酵培養(yǎng)及磷脂酶D酶活檢測，進而得到高效表達磷脂酶D的重組鏈霉菌。選用鏈霉菌來源的磷脂酶D進行重組蛋白異源表達，具有天然優(yōu)勢，對磷脂酶D合成基因進行了密碼子優(yōu)化，選取變鉛青鏈霉菌SBT5作為異源表達宿主，優(yōu)異的異源表達效果加上良好的胞外活性分泌表達效果，使得該重組菌株具有極高的創(chuàng)新性和實用性。??