一種磷脂酶D的異源表達(dá)重組質(zhì)粒以及其構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202011640263.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN112813090A 公開（公告）日 2021-05-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN112813090A 申請(qǐng)公布日 2021-05-18
分類號(hào) C12N15/76;C12N15/55 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱海華;王鋆坦;王慧;王小瑞;葛瑞宏;王永;王法云;譚靜 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 河南省商業(yè)科學(xué)研究所有限責(zé)任公司
代理機(jī)構(gòu) 成都弘毅天承知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 李穎
地址 450000 河南省鄭州市金水區(qū)文化路87號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種磷脂酶D的異源表達(dá)重組質(zhì)粒，其構(gòu)建方法包括步驟一，人工合成質(zhì)粒pUC57?STR_ORI，步驟二，人工合成質(zhì)粒pUC57?STR_PLD，步驟三，重組質(zhì)粒的構(gòu)建，最終得到包括Kasop*組成型強(qiáng)啟動(dòng)子，肉桂鏈霉菌的信號(hào)肽，鏈霉菌來源的磷脂酶D合成基因和ApmR抗性篩選基因的重組質(zhì)粒。本發(fā)明中所得重組質(zhì)粒能夠在鏈霉菌中成功表達(dá)，啟動(dòng)子具有強(qiáng)啟動(dòng)作用，信號(hào)肽能夠使引導(dǎo)新合成的蛋白質(zhì)向分泌通路轉(zhuǎn)移的效果良好，磷脂酶D合成基因段能夠使得磷脂酶D成功表達(dá)。本發(fā)明中通過質(zhì)粒合成方法合成基因的表達(dá)元件，進(jìn)而形成完整的重組質(zhì)粒，且質(zhì)粒結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，并且便于向鏈霉菌宿主內(nèi)轉(zhuǎn)移，并保證在鏈霉菌宿主內(nèi)成功表達(dá)。