重組質(zhì)粒及其制備方法和利用其制備的能表達(dá)耐高溫α-淀粉酶的細(xì)胞的制備方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910126303.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN109837294B 公開(kāi)（公告）日 2021-04-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN109837294B 申請(qǐng)公布日 2021-04-27
分類(lèi)號(hào) C12N15/75;C12N15/66;C12N1/21;C12N9/28;C12R1/125 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周輝 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 廣州睿辰生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蕪湖安匯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 尹婷婷
地址 510000 廣東省廣州市廣州高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)科學(xué)城開(kāi)源大道11號(hào)B10棟3層306房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種重組質(zhì)粒及其制備方法和利用其制備的能表達(dá)耐高溫α?淀粉酶的細(xì)胞的制備方法及應(yīng)用。首先制備含有P43啟動(dòng)子和lacO與lacI基因的重組質(zhì)粒；再將耐高溫α?淀粉酶基因連接至重組質(zhì)粒當(dāng)中，質(zhì)粒中含有枯草芽孢桿菌強(qiáng)啟動(dòng)子P43，大大提高了耐高溫α?淀粉酶的產(chǎn)量，同時(shí)質(zhì)粒中含有的lacO與lacI基因序列，可以使用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，相比于微生物誘變育種更加的快捷和目的性；然后將受體細(xì)胞和和含有耐高溫α?淀粉酶基因的載體通過(guò)電擊轉(zhuǎn)化之后即可得到得到能表達(dá)耐高溫α?淀粉酶的細(xì)胞。當(dāng)使用枯草芽孢桿菌為受體細(xì)胞時(shí)，其基因信息明確，生產(chǎn)速度快，培養(yǎng)密度大，可提耐高溫α?淀粉酶的產(chǎn)量和酶活力。