重組質(zhì)粒及其制備方法和利用其制備的能表達耐高溫α-淀粉酶的細胞的制備方法及應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910126303.0 申請日 -
公開（公告）號 CN109837294A 公開（公告）日 2019-06-04
申請公布號 CN109837294A 申請公布日 2019-06-04
分類號 C12N15/75;C12N15/66;C12N1/21;C12N9/28;C12R1/125 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周輝 申請（專利權）人 廣州睿辰生物科技有限公司
代理機構 蕪湖安匯知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 尹婷婷
地址 510000 廣東省廣州市廣州高新技術產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)科學城開源大道11號B10棟3層306房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組質(zhì)粒及其制備方法和利用其制備的能表達耐高溫α?淀粉酶的細胞的制備方法及應用。首先制備含有P43啟動子和lacO與lacI基因的重組質(zhì)粒；再將耐高溫α?淀粉酶基因連接至重組質(zhì)粒當中，質(zhì)粒中含有枯草芽孢桿菌強啟動子P43，大大提高了耐高溫α?淀粉酶的產(chǎn)量，同時質(zhì)粒中含有的lacO與lacI基因序列，可以使用IPTG進行誘導表達，相比于微生物誘變育種更加的快捷和目的性；然后將受體細胞和和含有耐高溫α?淀粉酶基因的載體通過電擊轉(zhuǎn)化之后即可得到得到能表達耐高溫α?淀粉酶的細胞。當使用枯草芽孢桿菌為受體細胞時，其基因信息明確，生產(chǎn)速度快，培養(yǎng)密度大，可提耐高溫α?淀粉酶的產(chǎn)量和酶活力。