人胚腎293細胞亞克隆細胞株

基本信息

申請?zhí)?/td> CN03126889.7 申請日 -
公開(公告)號 CN100427590C 公開(公告)日 2008-10-22
申請公布號 CN100427590C 申請公布日 2008-10-22
分類號 C12N5/10(2006.01);C12N15/11(2006.01);C12N15/53(2006.01);C12N9/02(2006.01) 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張曉志;彭朝暉 申請(專利權)人 深圳市賽百諾基因技術有限公司
代理機構 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 張曉志;彭朝暉;深圳市賽百諾基因技術有限公司
地址 518057廣東省深圳市高新技術產(chǎn)業(yè)園(北區(qū))郎山路賽百諾公司
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種用于生產(chǎn)重組腺病毒制品的人胚腎293細胞亞克隆細胞株,該細胞株是由ATCC 293細胞經(jīng)亞克隆方法制得,它含有人三磷酸甘油醛脫氫(human glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase,GAPD),該細胞株由下列方法培養(yǎng)制得:a、將ATCC293細胞(P32)復蘇后進行細胞擴增傳代至第33代次(P33),然后將P33細胞懸液用FACS流式細胞儀進行亞克??;b、用2個96孔板,每孔中0.2ml培養(yǎng)基中放置一個細胞,在36~38℃、3~6%CO2條件下培養(yǎng)6~10天;c、挑選出細胞形態(tài)均一、生長良好的、已達到不低于60%鋪滿生長的克隆;d、重復上述步驟四次,最后挑選出1個亞克隆的細胞柱(P37),繼續(xù)培養(yǎng)擴增并制成原代細胞庫(P38),置于-80℃凍存;e、以原代細胞庫(P38)為基礎制備主代細胞庫及工作細胞庫。本發(fā)明應用基因工程技術和分子克隆技術,使其具有明顯增強細胞的貼壁生長的功能和細胞生長倍增時間短的優(yōu)點。