一種人脂肪干細胞的分離培養(yǎng)方法和干細胞庫的構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210336264.5 申請日 -
公開（公告）號 CN103667187B 公開（公告）日 2016-05-18
申請公布號 CN103667187B 申請公布日 2016-05-18
分類號 C12N5/0775(2010.01)I;G06F19/28(2011.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張芝庭 申請（專利權(quán)）人 貴州神奇投資有限公司
代理機構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 貴州神奇集團控股有限公司;貴州神奇藥物研究院
地址 550000 貴州省貴陽市北京路1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人脂肪干細胞的分離培養(yǎng)方法和干細胞庫的構(gòu)建方法，包括以下步驟：（1）采集人脂肪組織；（2）獲取和分離人脂肪干細胞；（3）干細胞培養(yǎng)；（4）檢測、凍存；（5）建庫。本發(fā)明采用D-Hanks平衡鹽液配制的含有Ⅰ型和Ⅵ型膠原酶的混合膠原酶對脂肪組織進行消化，使得組織消化的更徹底，明顯降低雜細胞數(shù)量和除去組織塊；用含有10-15%胎牛血清、103-105U/mlLIF的MCDB-201培養(yǎng)液對分離后的干細胞進行培養(yǎng)，細胞增殖快、形態(tài)好，能有效抑制干細胞的分化，保證原代干細胞的特性，同時還能促進人脂肪干細胞的長期生長，以及保持自我更新及多向分化潛能等特點；將得到的干細胞建庫保存，保證了更為優(yōu)質(zhì)的種子細胞來源。