單鏈測序文庫的構建方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811306568.0 申請日 -
公開（公告）號 CN109536579A 公開（公告）日 2019-03-29
申請公布號 CN109536579A 申請公布日 2019-03-29
分類號 C12Q1/6806（2018.01）I; C12Q1/6869（2018.01）I; C40B50/06（2006.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張巨永; 盧瀚林 申請（專利權）人 深圳市艾斯基因科技有限公司
代理機構 廣州高炬知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 董博
地址 518000 廣東省深圳市龍崗區(qū)布吉街道布吉廣場B座923
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了提供了高通量測序文庫的構建方法及其應用。其中，構建高通量測序文庫的方法包括：將基因組DNA片段化和末端修復的DNA片段的3’末端添加堿基A，連接接頭并擴增后，將所述DNA文庫用外切酶進行消化得到單鏈DNA文庫；利用特異性探針對連接產(chǎn)物進行雜交捕獲，以便獲得目的片段。本發(fā)明改進DNA雜交流程，將常規(guī)雙鏈DNA模板通過酶切消化成單鏈，再采用環(huán)狀寡核苷酸的完全封閉引入的接頭和標簽序列，用探針(RNA或DNA)對單鏈DNA模板進行捕獲，可以降低雜交捕獲的時間，提高探針捕獲目的DNA序列的效率，降低GC區(qū)域捕獲的偏好性。