一種尿蛋白制備方法及尿蛋白質(zhì)組的檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710048099.6 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108333263A 公開（公告）日 2018-07-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN108333263A 申請(qǐng)公布日 2018-07-27
分類號(hào) G01N30/02;G01N30/06 分類 測(cè)量；測(cè)試;
發(fā)明人 秦鈞;冷文川;倪曉天;路天元;甄蓓;王廣舜;孫長(zhǎng)青;鐘博文 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京松果天目健康管理有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京驥馳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京蛋白質(zhì)組研究中心;北京松果天目健康管理有限公司
地址 102206 北京市昌平區(qū)生命科學(xué)園38號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種尿蛋白質(zhì)組的檢測(cè)方法，包括尿蛋白的制備、在蛋白或肽水平的分離、質(zhì)譜鑒定，其特征在于，所述尿蛋白制備方法包括下面步驟(1)將尿液樣品在常溫下超速離心一段時(shí)間，棄去上清液，保留沉淀；(2)向步驟(1)所述的沉淀中加入適量的重懸緩沖液使沉淀重懸；(3)向步驟(2)所得的重懸液中加入能打開二硫鍵的還原劑，于37?80℃溫度下加熱10?60分鐘；(4)向步驟(3)所得的溶液中添加清洗緩沖液，然后高速離心一段時(shí)間，棄去上清，保留沉淀；(5)用消化緩沖液重新溶解步驟(4)所得的沉淀，之后進(jìn)行蛋白的溶液內(nèi)酶解，或用一維電泳(SDS?PAGE)進(jìn)行蛋白分離。本發(fā)明方法簡(jiǎn)化了尿蛋白的制備過程、提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，并且可用于高通量定量深度尿蛋白質(zhì)組檢測(cè)。