一種可溶性表達(dá)人腦利鈉肽重組蛋白的方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410139968.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN103923937B 公開(kāi)(公告)日 2016-09-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN103923937B 申請(qǐng)公布日 2016-09-07
分類號(hào) C12N15/70(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C07K14/575(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;A61K38/22(2006.01)I;A61P9/04(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄒衛(wèi);張世光;周曉雷;宋浩雷;延志芬 申請(qǐng)(專利權(quán))人 石家莊沃泰生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州威世朋知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 楊林潔;東楠
地址 050000 河北省石家莊市橋西區(qū)中山西路168號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種可溶性表達(dá)人腦利鈉肽(Human?Brain?Natriuretic?Peptide,hBNP)重組蛋白的方法,包括如下步驟:1)獲得重組基因:獲得表達(dá)人腦利鈉肽重組蛋白的重組基因His?DsbAmut?BNP,所述重組基因的序列包括5’至3’方向依次排列的純化標(biāo)簽基因序列、分子伴侶蛋白基因序列、蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)序列和人腦利鈉肽基因序列;2)獲得重組質(zhì)粒:將上一步獲得的重組基因插入載體質(zhì)粒,獲得含有重組基因的重組質(zhì)粒;3)獲得基因工程菌:將上一步獲得的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞獲得基因工程菌;4)表達(dá)外源基因:基因工程菌發(fā)酵,表達(dá)含有重組人腦利鈉肽的融合蛋白;5)純化目的蛋白:裂解菌體,收集融合蛋白,通過(guò)蛋白酶酶切去除分子伴侶、層析純化步驟獲得重組人腦利鈉肽重組蛋白。