干細胞高效表達目的蛋白的制備方法和應用方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010295429.3 申請日 -
公開(公告)號 CN111440821A 公開(公告)日 2020-07-24
申請公布號 CN111440821A 申請公布日 2020-07-24
分類號 C12N15/85(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 劉榮坤;劉芳;岳緒娥 申請(專利權)人 北京本真工坊生物科技有限公司
代理機構 北京匯信合知識產權代理有限公司 代理人 王維新
地址 102206北京市昌平區(qū)生命園路9號院博暉創(chuàng)新大廈四層東區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種干細胞高效表達目的蛋白的制備方法和應用方法,其中制備方法包括:從人體組織中分離干細胞并進行培養(yǎng);結合PB轉座子、EF1A啟動子序列、KOZAK序列、所要表達的目的蛋白序列、T2A序列、所要表達目的蛋白序列、CD33信號肽序列、IRES序列、PURO序列和附加體系統,構建重組表達載體;將重組表達載體加入干細胞的培養(yǎng)懸液,采用電轉染方式獲得能夠表達目的蛋白的干細胞。通過本發(fā)明的技術方案,可以將重組表達載體轉移至干細胞中,迅速獲得高表達的細胞,可以增加兩種細胞因子的協同作用,使兩種細胞因子同時表達,使重組表達載體質粒在干細胞內長時間存在并高效表達目的蛋白。??