多重?cái)U(kuò)增子測序用引物系統(tǒng)、其應(yīng)用以及測序文庫的構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710814297.9 申請日 -
公開（公告）號 CN109486923A 公開（公告）日 2019-03-19
申請公布號 CN109486923A 申請公布日 2019-03-19
分類號 C12Q1/6869（2018.01）I; C12N15/11（2006.01）I; C40B50/06（2006.01）I; C12N15/10（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 羅景燕; 唐毅; 何廣良; 林釗; 李偉琴; 許少飛; 賴炳權(quán); 周艷河 申請（專利權(quán)）人 廣州永諾健康科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 廣州永諾生物科技有限公司; 廣州永諾健康科技有限公司
地址 510300 廣東省廣州市開發(fā)區(qū)廣州國際生物島螺旋三路6號第四層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種多重?cái)U(kuò)增子測序用引物系統(tǒng)、其應(yīng)用及測序文庫的構(gòu)建方法。該引物系統(tǒng)包括第一輪反向特異性引物組和第二輪正向特異性引物組。其中第一輪反向特異性引物組包括多個(gè)不同的第一輪反向特異性引物，每個(gè)所述反向特異性引物從5’端至3’端分別為反向接頭序列、條形碼序列和反向特異性序列。分子條形碼序列提供了一種很好的方法來跟蹤錯(cuò)配，利用下游分析，聚合酶在PCR過程中產(chǎn)生的錯(cuò)配可以與原始分子中出現(xiàn)的序列變異區(qū)分開來，最后通過去除低水平的假陽性來提高1％或更低的突變的檢測準(zhǔn)確率。通過計(jì)算讀數(shù)中唯一的分子條形碼序列數(shù)量，而不是計(jì)算總讀數(shù)的數(shù)量，也可以更好地實(shí)現(xiàn)目標(biāo)量化，因?yàn)榭傋x數(shù)更有可能被非均一性擴(kuò)增的所誤讀。