一種利用CRISPR/Cas9+AAV制備通用型CAR-T細(xì)胞的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811602586.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109609551A 公開（公告）日 2019-04-12
申請(qǐng)公布號(hào) CN109609551A 申請(qǐng)公布日 2019-04-12
分類號(hào) C12N15/864;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 邱壯偉;丘力功;符美娟;李潤(rùn)明;倪世明;郝宇 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣州白云山拜迪生物醫(yī)藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 顏希文;宋靜娜
地址 510070 廣東省廣州市番禺區(qū)萬(wàn)寶北街1號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種利用CRISPR/Cas9+AAV制備通用型CAR?T細(xì)胞的方法，屬于免疫細(xì)胞治療領(lǐng)域。本發(fā)明利用CRISPR/Cas9+AAV敲除免疫檢查點(diǎn)PD?1、人類白細(xì)胞抗原(HLA)以及TCR，多基因敲除制備通用型CAR?T細(xì)胞，利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)進(jìn)行精確基因敲除，同時(shí)與腺相關(guān)病毒(AAV)融合運(yùn)用，代替慢病毒實(shí)現(xiàn)精確基因敲入，避免慢病毒隨機(jī)整合潛在的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明的方法可以實(shí)現(xiàn)多靶點(diǎn)基因敲入和敲除，構(gòu)建通用型CAR?T細(xì)胞用于異體治療，解決傳統(tǒng)CAR?T細(xì)胞治療存在的慢病毒隨機(jī)插入性突變風(fēng)險(xiǎn)、自體CAR?T的設(shè)計(jì)及培養(yǎng)制備成本過(guò)高、制備周期長(zhǎng)，細(xì)胞數(shù)量及擴(kuò)增能力不足等問(wèn)題。