原核表達(dá)載體及rbFGF?2表達(dá)方法與工程菌和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710398868.5 申請日 -
公開（公告）號 CN107217069A 公開（公告）日 2017-09-29
申請公布號 CN107217069A 申請公布日 2017-09-29
分類號 C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 徐曉輝;王莉潔;孫丹;何偉 申請（專利權(quán)）人 沈陽科康科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 馬馳
地址 110163 遼寧省沈陽市東陵區(qū)泗水街66號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種高效表達(dá)重組牛成纖維細(xì)胞生長因子?2(rbFGF?2)的方法。本發(fā)明首先根據(jù)大腸桿菌密碼子使用偏好性，對FGF2基因序列的密碼子進(jìn)行替換，設(shè)計合成了rbFGF?2核苷酸序列全長，構(gòu)建得到能夠表達(dá)rbFGF?2蛋白的表達(dá)載體，將該表達(dá)載體與分子伴侶質(zhì)粒先后導(dǎo)入到同一大腸桿菌中進(jìn)行共表達(dá)。本發(fā)明解決了原核生物與真核生物在密碼子使用偏好上存在差異，導(dǎo)致外源基因在大腸桿菌體內(nèi)不能高效表達(dá)的問題；同時，通過與分子伴侶共表達(dá)，增進(jìn)目標(biāo)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性，顯著提高了rbFGF?2蛋白的產(chǎn)量和活性。