原核表達載體及rbFGF-2表達方法與工程菌和應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710398868.5 申請日 -
公開(公告)號 CN107217069B 公開(公告)日 2017-09-29
申請公布號 CN107217069B 申請公布日 2017-09-29
分類號 C12N15/70(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 徐曉輝;王莉潔;孫丹;何偉 申請(專利權(quán))人 沈陽科康科技有限公司
代理機構(gòu) 沈陽科苑專利商標代理有限公司 代理人 馬馳
地址 110163遼寧省沈陽市東陵區(qū)泗水街66號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種高效表達重組牛成纖維細胞生長因子?2(rbFGF?2)的方法。本發(fā)明首先根據(jù)大腸桿菌密碼子使用偏好性,對FGF2基因序列的密碼子進行替換,設計合成了rbFGF?2核苷酸序列全長,構(gòu)建得到能夠表達rbFGF?2蛋白的表達載體,將該表達載體與分子伴侶質(zhì)粒先后導入到同一大腸桿菌中進行共表達。本發(fā)明解決了原核生物與真核生物在密碼子使用偏好上存在差異,導致外源基因在大腸桿菌體內(nèi)不能高效表達的問題;同時,通過與分子伴侶共表達,增進目標蛋白質(zhì)穩(wěn)定性,顯著提高了rbFGF?2蛋白的產(chǎn)量和活性。??