原核表達載體及rbFGF-2表達方法與工程菌和應用
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201710398868.5 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN107217069B | 公開(公告)日 | 2017-09-29 |
申請公布號 | CN107217069B | 申請公布日 | 2017-09-29 |
分類號 | C12N15/70(2006.01)I | 分類 | 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 徐曉輝;王莉潔;孫丹;何偉 | 申請(專利權(quán))人 | 沈陽科康科技有限公司 |
代理機構(gòu) | 沈陽科苑專利商標代理有限公司 | 代理人 | 馬馳 |
地址 | 110163遼寧省沈陽市東陵區(qū)泗水街66號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明提供了一種高效表達重組牛成纖維細胞生長因子?2(rbFGF?2)的方法。本發(fā)明首先根據(jù)大腸桿菌密碼子使用偏好性,對FGF2基因序列的密碼子進行替換,設計合成了rbFGF?2核苷酸序列全長,構(gòu)建得到能夠表達rbFGF?2蛋白的表達載體,將該表達載體與分子伴侶質(zhì)粒先后導入到同一大腸桿菌中進行共表達。本發(fā)明解決了原核生物與真核生物在密碼子使用偏好上存在差異,導致外源基因在大腸桿菌體內(nèi)不能高效表達的問題;同時,通過與分子伴侶共表達,增進目標蛋白質(zhì)穩(wěn)定性,顯著提高了rbFGF?2蛋白的產(chǎn)量和活性。?? |
