一種檢測VEGF靶向治療藥物生物學(xué)活性的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911347878.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110964745A 公開（公告）日 2020-04-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN110964745A 申請(qǐng)公布日 2020-04-07
分類號(hào) C12N15/85;C12N15/53;C12Q1/02;C12Q1/66 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 葉才果;何婉玲;王笑非 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣東安普澤生物醫(yī)藥股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 代理人 劉婉
地址 528231 廣東省佛山市南海區(qū)321國道仙溪段廣東生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)基地一期B棟六樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種檢測VEGF靶向治療藥物生物學(xué)活性的方法，其包括以下步驟：構(gòu)建編碼KDR?NGFR融合蛋白的核苷酸序列，將其進(jìn)行全長克隆到空白載體中，轉(zhuǎn)染第一細(xì)胞，用殺稻瘟菌素殺死未穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，在殺稻瘟菌素下正常生長的細(xì)胞為第二細(xì)胞；構(gòu)建轉(zhuǎn)錄因子NF?kB重組結(jié)合序列，然后將其克隆到熒光素酶報(bào)告基因載體中，轉(zhuǎn)染第二細(xì)胞，用殺稻瘟菌素和嘌呤霉素殺死未穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，在殺稻瘟菌素和嘌呤霉素下正常生長的細(xì)胞為第三細(xì)胞；接種第三細(xì)胞，加入VEGF靶向治療藥物和VEGF，培養(yǎng)細(xì)胞；裂解細(xì)胞，加入熒光素酶的底物，檢測熒光強(qiáng)度，以確定所述VEGF靶向治療藥物阻斷VEGF的生物學(xué)活性。本發(fā)明的方法能準(zhǔn)確、簡單易行、快速檢測VEGF靶向藥物的生物學(xué)活性。