編碼PCR二代測(cè)序建庫(kù)方法、試劑盒及檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710102701.X 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN108504649A 公開(kāi)（公告）日 2018-09-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN108504649A 申請(qǐng)公布日 2018-09-07
分類(lèi)號(hào) C12N15/10;C12N15/11;C40B50/06;G06F19/24 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃新華;戴慧清 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 上?；律镝t(yī)藥科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海市匯業(yè)律師事務(wù)所 代理人 陸紅杰
地址 201321 上海市浦東新區(qū)康新公路3399弄25號(hào)樓5層504室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種編碼PCR二代測(cè)序建庫(kù)方法，步驟包括：1)提取DNA；2)用帶隨機(jī)分子編碼序列的單端特異引物進(jìn)行正向單鏈線(xiàn)性擴(kuò)增反應(yīng)；3)用對(duì)側(cè)單端特異引物與公共接頭引物構(gòu)成引物對(duì)，進(jìn)行單端特異指數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)；4)用測(cè)序雙端公共接頭引物對(duì)進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)；5)定量質(zhì)檢，獲得DNA文庫(kù)。本發(fā)明還公開(kāi)了用上述DNA文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序檢測(cè)的方法，及包含該DNA文庫(kù)的編碼PCR二代測(cè)序建庫(kù)試劑盒。本發(fā)明通過(guò)將樣品原始DNA模板序列在初始互補(bǔ)合成中進(jìn)行編碼，使測(cè)序結(jié)果可以根據(jù)編碼溯源檢出初始DNA模板的真實(shí)序列和真實(shí)檢出分子數(shù)，從而顯著降低了突變假陽(yáng)性和假陰性。