基于不對稱AS2-PCR的基因變異檢測方法及引物

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510654829.8 申請日 -
公開（公告）號 CN106566871A 公開（公告）日 2017-04-19
申請公布號 CN106566871A 申請公布日 2017-04-19
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃新華;戴慧清;李冰 申請（專利權(quán)）人 上?；律镝t(yī)藥科技有限公司
代理機構(gòu) 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 丁紀鐵
地址 201318 上海市浦東新區(qū)天雄路199號1幢第三層C區(qū)和第四層C區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于不對稱AS2?PCR的基因變異檢測方法，步驟包括：1)提取樣本DNA；2)擴增待測基因片段；3)將擴增產(chǎn)物加到不對稱AS2?PCR反應體系中，進行PCR擴增反應和探針外切反應；所述AS2?PCR反應體系含有2條帶熒光標記的通用標簽信號探針、2條正向引物、1條反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR緩沖液；4)檢測反應的熒光信號，計算兩個通道的Ct差值，并根據(jù)Ct差值判斷待測基因SNP。本發(fā)明還公開了用于上述方法的不對稱AS2?PCR寡核苷酸引物組及其用途。本發(fā)明通過設計不對稱AS2?PCR的引物，克服了傳統(tǒng)AS2?PCR假陽性率高的問題，提高了基因變異檢測的準確性。