基于不對(duì)稱AS2-PCR的基因變異檢測(cè)方法及引物

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510654829.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN106566871A 公開（公告）日 2017-04-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN106566871A 申請(qǐng)公布日 2017-04-19
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃新華;戴慧清;李冰 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海基致生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海浦一知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 丁紀(jì)鐵
地址 201318 上海市浦東新區(qū)天雄路199號(hào)1幢第三層C區(qū)和第四層C區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于不對(duì)稱AS2?PCR的基因變異檢測(cè)方法，步驟包括：1)提取樣本DNA；2)擴(kuò)增待測(cè)基因片段；3)將擴(kuò)增產(chǎn)物加到不對(duì)稱AS2?PCR反應(yīng)體系中，進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)和探針外切反應(yīng)；所述AS2?PCR反應(yīng)體系含有2條帶熒光標(biāo)記的通用標(biāo)簽信號(hào)探針、2條正向引物、1條反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR緩沖液；4)檢測(cè)反應(yīng)的熒光信號(hào)，計(jì)算兩個(gè)通道的Ct差值，并根據(jù)Ct差值判斷待測(cè)基因SNP。本發(fā)明還公開了用于上述方法的不對(duì)稱AS2?PCR寡核苷酸引物組及其用途。本發(fā)明通過(guò)設(shè)計(jì)不對(duì)稱AS2?PCR的引物，克服了傳統(tǒng)AS2?PCR假陽(yáng)性率高的問(wèn)題，提高了基因變異檢測(cè)的準(zhǔn)確性。