基于分子標(biāo)簽和二代測序降低測序錯誤的測序方法、試劑盒及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810067545.2 申請日 -
公開（公告）號 CN108148900A 公開（公告）日 2018-06-12
申請公布號 CN108148900A 申請公布日 2018-06-12
分類號 C12Q1/6869 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 于丹;姚旭梅;涂小年;李小花;劉朝煜 申請（專利權(quán)）人 深圳因合生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市徽正知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 深圳因合生物科技有限公司;深圳因和生物科技有限公司
地址 518000 廣東省深圳市前海深港合作區(qū)前灣一路1號A棟201室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于分子標(biāo)簽和二代測序降低測序錯誤的測序方法、試劑盒以及其應(yīng)用，測序方法包括：S1.針對每個樣本合成4?16種含有不同固定特異序列標(biāo)簽的接頭的正鏈P5和反鏈P7，將P5和P7退火，形成Y字型接頭；S2.將模板DNA末端補(bǔ)平，并在3’端添加A堿基；S3.將Y字型接頭連接到處理后的模板DNA兩端；S4.回收連接上接頭的模板DNA，并用帶有樣本標(biāo)簽的接頭引物對模板DNA進(jìn)行富集擴(kuò)增；S5.回收經(jīng)富集擴(kuò)增的產(chǎn)物；S6.對富集擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行二代測序。本發(fā)明方法可有效識別雙鏈DNA原始模板中的突變，尤其是不對稱突變,因而可有效識別從第一次富集擴(kuò)增開始引入的擴(kuò)增錯誤,在Illumina單端和雙端樣本標(biāo)簽測序模式下，通過樣本獨(dú)有的4?16種接頭的固定特異序列，可有效解決樣本標(biāo)簽漂移問題。