基于重組熒光病毒的血清4型禽腺病毒中和抗體的檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111207886.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113917139A 公開（公告）日 2022-01-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN113917139A 申請(qǐng)公布日 2022-01-11
分類號(hào) G01N33/569（2006.01）I;G01N33/58（2006.01）I;G01N33/68（2006.01）I 分類 測(cè)量；測(cè)試;
發(fā)明人 郭藝文;葉建強(qiáng);謝松樺;張建軍;徐貞琦;張偉;謝泉;萬志敏;李拓凡 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 國藥集團(tuán)揚(yáng)州威克生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京源點(diǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陳彩霞;王佳妹
地址 225000江蘇省揚(yáng)州市大學(xué)南路88號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于重組熒光病毒的血清4型禽腺病毒中和抗體的檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：S1、將待檢血清稀釋后與10000～20000TCID50/50μL的熒光病毒FAdV?4?EGFP混合，恒溫孵育1～2h；S2、將孵育好的病毒與血清的混合物接種于LMH細(xì)胞中并培養(yǎng)24～36h，然后在熒光顯微鏡下觀察熒光病毒被中和情況。本發(fā)明以前期拯救的表達(dá)綠色熒光蛋白的重組病毒FAdV?4?EGFP為基礎(chǔ)，該毒株為高度致弱疫苗候選株，高劑量肌注感染雞也不發(fā)病，與親本株生長(zhǎng)特性相近、生物安全性高、不存在散播強(qiáng)毒的隱患；相比于傳統(tǒng)的中和試驗(yàn)，本發(fā)明提供的方案最短僅需要感染重組病毒24h后即可觀察結(jié)果，可實(shí)現(xiàn)中和試驗(yàn)結(jié)果提前2?3天，大幅縮短了檢測(cè)所需時(shí)間。