一種細(xì)胞和組織全蛋白提取方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710261212.9 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN106892963A 公開(kāi)（公告）日 2017-06-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN106892963A 申請(qǐng)公布日 2017-06-27
分類(lèi)號(hào) C07K1/14 分類(lèi) 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 不公告發(fā)明人 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 南通柯侎克生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 226300 江蘇省南通市高新區(qū)世紀(jì)大道266號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種細(xì)胞和組織全蛋白提取方法，分別采用變性裂解液以及非變性裂解液作為試劑，采用離心機(jī)、1.5ml離心試管和中部具有一道隔膜的50ml柱形聚乙烯離心試管作用提取工具，經(jīng)以下幾個(gè)步驟制得，第一步，把細(xì)胞放于1.5ml離心試管中，并加入1ml的?PBS細(xì)胞洗滌溶液，然后用離心機(jī)離心3分鐘，棄除上清，離心、棄除上清流程共重復(fù)三次，第二步，根據(jù)細(xì)胞沉淀體積加入預(yù)冷的PBS細(xì)胞洗滌溶液，進(jìn)行細(xì)胞重懸，第三步，根據(jù)離心試管內(nèi)細(xì)胞量加入變性裂解液，震蕩15s，第四步，將震蕩后裂解液轉(zhuǎn)移于50ml柱形聚乙烯離心試管內(nèi)，離心機(jī)離心30s?后，收集管底的裂解液即為全細(xì)胞蛋白提取液，第五步，加入蛋白酶抑制劑。本發(fā)明能提高速度和減少蛋白丟失。