一種蛋白質(zhì)凝膠樣品的質(zhì)譜檢測前處理方法及處理試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010578728.8 申請日 -
公開（公告）號 CN111721939A 公開（公告）日 2020-09-29
申請公布號 CN111721939A 申請公布日 2020-09-29
分類號 G01N33/68(2006.01)I 分類 測量；測試;
發(fā)明人 尚駿;陳希;劉宜子;陳繼鋒;許夢玲;韓強(qiáng)強(qiáng);杜博賈 申請（專利權(quán)）人 譜度眾合（武漢）生命科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢臻誠專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 譜度眾合（武漢）生命科技有限公司
地址 430070湖北省武漢市洪山區(qū)高新大道666號光谷生物園B5棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種蛋白質(zhì)凝膠樣品的質(zhì)譜檢測前處理方法及處理試劑盒。所述方法包括(1)膠內(nèi)酶解：將蛋白質(zhì)凝膠電泳的待檢測泳道部分細(xì)碎化后，經(jīng)洗滌、蛋白質(zhì)還原處理、蛋白質(zhì)烷基化處理、蛋白酶酶解處理后，采用酸性乙腈溶液進(jìn)行肽段抽提，獲得肽段?酸性乙腈溶液；(2)肽段脫鹽：將肽段?乙腈溶液，轉(zhuǎn)移至填充有具有陽離子交換作用的反相色譜填料的分離柱，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1％?0.5％的三氟乙酸進(jìn)行脫鹽洗滌，并采用堿性乙腈溶液洗脫，收集含有肽段的洗脫液，作為質(zhì)譜檢測進(jìn)樣樣品。所述包括：肽段抽提液、脫鹽清洗液、以及脫鹽洗脫液。本發(fā)明降低了對實(shí)驗(yàn)條件的要求，并且縮短樣品制備時(shí)間至一半左右。??