生產(chǎn)利妥昔單抗的高表達(dá)、高穩(wěn)定性CHO細(xì)胞株及其構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710087562.8 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN108456660A 公開(kāi)（公告）日 2018-08-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN108456660A 申請(qǐng)公布日 2018-08-28
分類(lèi)號(hào) C12N5/10;C12N15/13;C12N15/85;C07K16/28 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 沈彬彬;王蕙文;吳幼玲 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 浙江特瑞思藥業(yè)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 浙江特瑞思藥業(yè)股份有限公司
地址 313000 浙江省湖州市紅豐路1366號(hào)南太湖科創(chuàng)中心5幢3層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種生產(chǎn)利妥昔單抗的高表達(dá)、高穩(wěn)定性CHO細(xì)胞株及其構(gòu)建方法。具體地本發(fā)明利用經(jīng)懸浮馴化的CHO?K1作為宿主細(xì)胞，構(gòu)建單克隆抗體輕鏈(Light Chain,LC)pcDNA3?RX?Neo和重鏈(Heavy Chain,HC)pcDNA3?RX?GS雙表達(dá)質(zhì)粒，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染外源雙質(zhì)粒，經(jīng)雙篩選標(biāo)記篩選、基因擴(kuò)增和對(duì)基因擴(kuò)增后細(xì)胞系進(jìn)行篩選，得到了適合無(wú)血清懸浮培養(yǎng)的、穩(wěn)定的、高效表達(dá)利妥昔單抗的TRS001細(xì)胞株D3G6C11。其產(chǎn)量在1.7?2.2g/L之間,為大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化制備利妥昔單抗奠定了良好基礎(chǔ)。