免提取直接擴增的人MTHFR基因SNP分型快速試紙條檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201611052973.5 申請日 -
公開(公告)號 CN106498074A 公開(公告)日 2017-03-15
申請公布號 CN106498074A 申請公布日 2017-03-15
分類號 C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張朝;崔亞麗;朱娟莉;惠文利;張秦魯;魏華;劉克武 申請(專利權(quán))人 金磁(蘇州)納米科技有限公司
代理機構(gòu) 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 黃杭飛
地址 215163 江蘇省蘇州市高新區(qū)錦峰8號11號樓一、二、三層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種免提取直接擴增的人MTHFR基因SNP分型快速試紙條檢測方法,包括如下步驟:步驟一、將樣本與樣本處理液混合并靜置5分鐘,作為模版使用;步驟二、針對待檢測MTHFR基因C677T?SNP位點,分別設(shè)計一條野生型特異性引物、一條突變型特異性引物和一條共用引物進行識別與擴增;在野生型特異性引物和突變型特異性引物的5′端均標記地高辛,共用引物的5′端標記生物素;步驟三、針對每一個樣本,平行做兩管PCR反應(yīng),獲得擴增產(chǎn)物;步驟四、采用層析技術(shù)并以地高辛和地高辛單抗作用、生物素和鏈親和素作用,對步驟三得到的擴增產(chǎn)物進行試紙條分型檢測,判讀基因型。