一種不依賴VB12的聚球藻PCC 7002工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910305057.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110172432A 公開（公告）日 2019-08-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN110172432A 申請(qǐng)公布日 2019-08-27
分類號(hào) C12N1/21;C12N15/74;C12N15/54;C12N15/90;C12R1/01 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王軍 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市奧極因科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 合肥市長遠(yuǎn)專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 深圳市奧極因科技有限公司
地址 518000 廣東省深圳市南山區(qū)粵海街道軟件產(chǎn)業(yè)基地4棟A座1102室6區(qū)3號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種不依賴VB12的聚球藻PCC 7002工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用，涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，是通過同源重組實(shí)現(xiàn)外源基因的插入，將聚球藻PCC 7002中的A2746上游的同源臂基因片段、聚球藻PCC 7002的cpcBA啟動(dòng)子基因、目的蛋白表達(dá)基因、鈷胺素非依賴型甲硫氨酸合成酶基因metE、聚球藻PCC 7002中的A2746下游的同源臂基因片段依次連接到pAQ1質(zhì)粒上，得到載體Q29；將Q29載體轉(zhuǎn)化到聚球藻PCC 7002，獲得不依賴VB12的聚球藻PCC 7002工程菌。本發(fā)明利用基因工程在PCC 7002菌株中導(dǎo)入了metE基因的重組質(zhì)粒，獲得在不添加VB12的條件下生長，且菌株表達(dá)蛋白使得細(xì)菌自動(dòng)沉降的不依賴VB12的聚球藻PCC 7002工程菌，可用于借助聚球藻表達(dá)的各種外源蛋白的表達(dá)。