一種利用甲基化酶的保護(hù)高效重組表達(dá)限制性內(nèi)切酶的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201611048568.6 申請日 -
公開（公告）號 CN106480076B 公開（公告）日 2020-01-24
申請公布號 CN106480076B 申請公布日 2020-01-24
分類號 C12N15/55;C12N15/70;C12N9/22 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 高嵩;尹欣;王佩;陳凱;韓挺翰;孫峰;許恒皓 申請（專利權(quán)）人 莫納（連云港）生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 連云港潤知專利代理事務(wù)所 代理人 莫納（連云港）生物科技有限公司
地址 222000 江蘇省連云港市海州區(qū)花果山大道17號科技創(chuàng)業(yè)城1號樓13-14層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明是一種利用甲基化酶的保護(hù)高效重組表達(dá)限制性內(nèi)切酶的方法，其特征在于：所述的甲基化酶是M.Sss I；所述限制性內(nèi)切酶D選自：AatII、AciI、AclI、AfeI、AgeI、AscI、AsiSI、AvaI、BceAI、BmgBI、BsaAI、BsaHI、BsiEI、BsiWI、BsmBI、BspDI、BspEI、BsrFI、BssHII、BstBI、BstUI、BtgZI、ClaI、EagI、FauI、FseI、FspI、HaeII、HgaI、HhaI、HinP1I、HpaII、Hpy99I、HpyCH4IV、KasI、MluI、NaeI、NarI、NgoMIV、NotI、NruI、Nt.BsmAI、Nt.CviPII、PaeR7I、PluTI、PmlI、PvuI、RsrII、SacII、SalI、SfoI、SgrAI、SmaI、SnaBI、TliI、TspMI、XhoI、XmaI、ZraI。本發(fā)明方法重組工程菌的構(gòu)建過程中直接使用廣譜保護(hù)型甲基化酶M.Sss I，無需針對單個(gè)限制性內(nèi)切酶進(jìn)行繁瑣的甲基化酶基因篩選，應(yīng)用范圍廣泛，大大簡化了重組表達(dá)過程。