一種基于數(shù)字PCR平臺的EGFR基因擴增的檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011458578.3 申請日 -
公開（公告）號 CN112430646A 公開（公告）日 2021-03-02
申請公布號 CN112430646A 申請公布日 2021-03-02
分類號 C12Q1/6851;C12N15/11 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊春燕;段小紅;楊文娟;丁蕊;張騰龍;周啟明 申請（專利權）人 南京求臻基因科技有限公司
代理機構 重慶百潤洪知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 姚瓊斯
地址 210000 江蘇省南京市江北新區(qū)浦濱路211號揚子科創(chuàng)中心一期A棟9樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及分子生物學技術領域，尤其是指一種基于數(shù)字PCR平臺的EGFR基因擴增的檢測方法，包括如下步驟：S1，cfDNA的提取：提取待測樣本的cfDNA，所述待測樣本為全血樣本；S2，制備數(shù)字PCR反應混合液：將待測樣本cfDNA模板、EGFR基因擴增區(qū)域正向和反向擴增引物、EGFR基因擴增區(qū)域TaqMan探針、內參基因EFTUD2正向和反向擴增引物、內參基因EFTUD2標記TaqMan探針以及ddPCR反應預混液混合，制備得到數(shù)字PCR反應混合液，所述cfDNA模板的含量為0.5～2ng/μL；S3，將步驟S2中得到的PCR反應混合液加載到數(shù)字PCR芯片中，進行ddPCR擴增反應；S4，PCR芯片熒光信號讀取；S5，數(shù)據(jù)分析和結果統(tǒng)計。本發(fā)明靈敏度高，操作簡單，無需采集組織標本，有效減少了病人的痛苦，特別適合對組織取樣不耐受的患者。