RNA文庫(kù)的構(gòu)建方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011120991.9 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN112176422A | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-01-05 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112176422A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-01-05 |
| 分類(lèi)號(hào) | C40B50/06(2006.01)I | 分類(lèi) | 組合技術(shù)〔8〕; |
| 發(fā)明人 | 李新;馬玉;李瑞強(qiáng);趙桂仿 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 天津諾禾致源生物信息科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京康信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 | 代理人 | 天津諾禾致源生物信息科技有限公司 |
| 地址 | 301700天津市武清區(qū)武清開(kāi)發(fā)區(qū)創(chuàng)業(yè)總部基地B07 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種RNA文庫(kù)的構(gòu)建方法。該構(gòu)建方法包括：采用逆轉(zhuǎn)錄引物對(duì)片段化的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到第一鏈cDNA，逆轉(zhuǎn)錄引物從5’端至3’端依次包括：已知序列和隨機(jī)序列；采用環(huán)化酶將第一鏈cDNA進(jìn)行單鏈接頭連接得到連接產(chǎn)物；對(duì)連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到RNA文庫(kù)。通過(guò)在對(duì)RNA逆轉(zhuǎn)錄合成第一鏈cDNA的同時(shí)即引入了第一測(cè)序引物序列，隨后直接通過(guò)環(huán)化酶進(jìn)行單鏈接頭連接引入第二測(cè)序引物序列，最后根據(jù)第一測(cè)序引物序列和第二測(cè)序引物序列設(shè)計(jì)合適的擴(kuò)增引物對(duì)接頭連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，即可得到RNA文庫(kù)。該方法既無(wú)需第二鏈cDNA的合成，也無(wú)需其他消化過(guò)程直接實(shí)現(xiàn)鏈特異性，操作簡(jiǎn)單，節(jié)省工時(shí)。?? |
