一種攜帶TGF-βRⅡ和NKG2D基因的NK92細(xì)胞株、制備方法及用途

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310036081.6 申請日 -
公開(公告)號 CN103396996B 公開(公告)日 2014-12-31
申請公布號 CN103396996B 申請公布日 2014-12-31
分類號 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉海燕;王仲娟;吳艷 申請(專利權(quán))人 無錫貝瑞康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京縱橫知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 董建林
地址 214023 江蘇省無錫市新區(qū)新泰路8號江蘇國際技術(shù)轉(zhuǎn)移中心
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于腫瘤過繼治療領(lǐng)域,具體涉及一種攜帶TGF-βRⅡ和NKG2D基因的NK92細(xì)胞株、制備方法及用途,所述的NK92細(xì)胞株轉(zhuǎn)染有TGF-βRⅡ胞外段跨膜區(qū)和NKG2D胞內(nèi)段構(gòu)成的融合基因TN。本發(fā)明公開了一種攜帶TGF-βRⅡ胞外段跨膜區(qū)及NKG2D胞內(nèi)段的自然殺傷細(xì)胞株(NK92-TN)及其制備方法、用途,制備時(shí)首先將TGF-βRⅡ胞外段跨膜區(qū)和NKG2D胞內(nèi)段兩段基因融合,將融合基因TN插入慢病毒制備的穿梭質(zhì)粒中,與其他包裝質(zhì)粒通過磷酸鈣方法轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,獲得慢病毒顆粒,進(jìn)而轉(zhuǎn)導(dǎo)NK92細(xì)胞,通過流式細(xì)胞分選儀分選YFP陽性的細(xì)胞,適用于臨床過繼免疫治療腫瘤,這一細(xì)胞株的抗腫瘤能力優(yōu)于其他靶向腫瘤抗原的細(xì)胞株,在TGF-β環(huán)境下能被有效激活,并有效抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。