一種重組人粒細胞集落刺激因子的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310150982.8 申請日 -
公開（公告）號 CN104120159A 公開（公告）日 2014-10-29
申請公布號 CN104120159A 申請公布日 2014-10-29
分類號 C12P21/02(2006.01)I;C07K14/53(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 岑仡;宋宏 申請（專利權）人 上海三維生物技術有限公司
代理機構 上海新天專利代理有限公司 代理人 上海三維生物技術有限公司
地址 上海市浦東新區(qū)金橋出口加工區(qū)桂橋路1150號C座
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種重組人粒細胞集落刺激因子的制備方法，包括：對rhG-CSF基因工程菌進行發(fā)酵培養(yǎng)，然后將培養(yǎng)菌體混懸于裂解液中，制得包涵體；將包涵體進行變性處理，然后用柱層析進行復性，得rhG-CSF復性液；最后進行陽離子層析和凝膠過濾層析，收集得到重組人粒細胞集落刺激因子。采用柱層析復性的方法，簡化了操作方式，使重組人粒細胞集落刺激因子的復性收率高于70%；復性液經(jīng)過陽離子交換和分子篩層析后制備成rhG-CSF的原液。原液電泳純度達到99%以上，RP-HPLC的純度達到98%以上，比活性6.6×107IU/mg。