酶學性能改善的甲基對硫磷水解酶突變體及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710505744.2 申請日 -
公開（公告）號 CN107189993B 公開（公告）日 2019-08-13
申請公布號 CN107189993B 申請公布日 2019-08-13
分類號 C12N9/16;C12N15/55;A62D3/02;A62D101/04;A62D101/28 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 龔曉潔;李立公;李光雷 申請（專利權(quán)）人 北京森根比亞生物工程技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京思元知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 北京森根比亞生物工程技術(shù)有限公司
地址 101407 北京市懷柔區(qū)雁棲經(jīng)濟開發(fā)區(qū)雁棲河西一路6號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了酶學性能改善的甲基對硫磷水解酶突變體及其應(yīng)用。本發(fā)明對野生型甲基對硫磷水解酶進行定點改造，結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)計算、模擬技術(shù)和分子生物學技術(shù)對OPHC2進行體外突變和表達，并運用生物化學手段檢測蛋白酶的動力學參數(shù)和穩(wěn)定性，篩選獲得熱穩(wěn)定性和底物親和力有顯著改善的突變體V117HQ119E以及催化效率顯著提高并在表面活性劑中穩(wěn)定性提高的突變體F263W，其氨基酸序列分別為SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示。本發(fā)明顯著改善了OPHC2的酶學性能，拓寬了OPHC2的應(yīng)用領(lǐng)域和作用效率，在有機磷農(nóng)藥降解、機體解毒和神經(jīng)毒劑洗消等方面應(yīng)用前景廣泛。