兔源對氧磷酶1突變體及其重組表達方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011091275.2 申請日 -
公開（公告）號 CN112226447A 公開（公告）日 2021-01-15
申請公布號 CN112226447A 申請公布日 2021-01-15
分類號 C12N15/55(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 龔曉潔;王璋 申請（專利權）人 北京森根比亞生物工程技術有限公司
代理機構 北京思元知識產(chǎn)權代理事務所（普通合伙） 代理人 北京森根比亞生物工程技術有限公司
地址 101407北京市懷柔區(qū)雁棲經(jīng)濟開發(fā)區(qū)雁棲河西一路6號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了兔源對氧磷酶1突變體及其重組表達方法。本發(fā)明通過克隆分離大耳白兔PON1基因，經(jīng)基因工程改造后獲得多個點突變基因，根據(jù)大腸桿菌密碼子偏好性對各突變基因進行密碼子優(yōu)化并構建攜帶不同標簽的原核表達載體經(jīng)誘導表達后，篩選到Trx?rePON1和MBP?rePON1蛋白，均可在大腸桿菌表達系統(tǒng)中產(chǎn)生完整、具有活性的可溶性蛋白，對乙酸苯酯和乙基對氧磷均具有較強的水解能力，對乙基對氧磷的水解活性分別是兔源本底血清PON1和家蠶中重組表達PON1活性的5和19倍。本發(fā)明實現(xiàn)了兔源PON1在大腸桿菌中的高效重組表達，為PON1在有機磷降解和生物醫(yī)藥領域的應用提供了新的選擇。??