一種新型冠狀病毒COVID-19-N蛋白表達和純化的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010481504.5 申請日 -
公開（公告）號 CN111499699A 公開（公告）日 2020-08-07
申請公布號 CN111499699A 申請公布日 2020-08-07
分類號 C07K14/165;C12N15/70;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12R1/19 分類 -
發(fā)明人 李健;張進;鐘芳林;萬雙燕 申請（專利權(quán)）人 深圳晶蛋生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機構(gòu) 新余市渝星知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 深圳晶蛋生物醫(yī)藥科技有限公司;萬雙燕;李健;張進;鐘芳林;江西晶美瑞生物醫(yī)藥有限公司
地址 518000 廣東省深圳市坪山區(qū)坪山街道六聯(lián)社區(qū)坪山大道2007號創(chuàng)新廣場C1102
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種新型冠狀病毒COVID?19?N蛋白表達和純化的方法，步驟有：構(gòu)建并轉(zhuǎn)化COVID?19?N蛋白表達質(zhì)粒；取菌液到含有50μg/ml Kan+抗生素的LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，加入IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng)；培養(yǎng)液離心，重懸，破碎后離心，取上清，選用鎳柱純化；依次用不同咪唑濃度的洗脫液進行洗脫，收集不同咪唑濃度的洗脫液；將純化的COVID?19?N蛋白進行透析。本發(fā)明的有點有：使用Pet?28a載體，利用大腸桿菌表達系統(tǒng)得到高產(chǎn)量、純度高達98％以上的COVID?19?N蛋白，免疫原性高，穩(wěn)定性好。該制備方法耗費成本低、操作簡單，可重復(fù)性高，可投入大量生產(chǎn)。