SARS主蛋白酶的表達(dá)和純化方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010901715.X | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN111979214A | 公開(kāi)（公告）日 | 2020-11-24 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111979214A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-11-24 |
| 分類號(hào) | C12N9/50;C12N15/70 | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 李健;熊兵 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 深圳晶蛋生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 新余市渝星知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 深圳晶蛋生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 地址 | 518000 廣東省深圳市坪山區(qū)坪山街道六聯(lián)社區(qū)坪山大道2007號(hào)創(chuàng)新廣場(chǎng)C1102 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了SARS主蛋白酶的表達(dá)和純化方法，步驟有：構(gòu)建并轉(zhuǎn)化表達(dá)質(zhì)粒；取菌液到含有50μg/ml Kan+抗生素的LB液體培養(yǎng)基中，在搖床上培養(yǎng)過(guò)夜；加入IPTG，誘導(dǎo)培養(yǎng)；菌液離心，在重懸緩沖液中重懸；破碎離心，取上清鎳柱純化，不同咪唑濃度的洗脫液進(jìn)行洗脫，將含有SARS主蛋白酶的洗脫液，進(jìn)行透析得到目的蛋白。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)有：利用大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)可在短時(shí)間內(nèi)獲得大量SARS主蛋白酶，通過(guò)特殊的純化方法可獲得純度高、穩(wěn)定性好的SARS主蛋白酶。整個(gè)SARS主蛋白酶蛋白表達(dá)和純化過(guò)程耗費(fèi)成本低、操作簡(jiǎn)單、可重復(fù)性高，可投入大量生產(chǎn)過(guò)程。 |
