一種在大腸桿菌表達系統(tǒng)中高效表達外源蛋白的方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010096475.0 申請日 -
公開（公告）號 CN113265365A 公開（公告）日 2021-08-17
申請公布號 CN113265365A 申請公布日 2021-08-17
分類號 C12N1/21（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;A61K39/12（2006.01）I;A61K39/245（2006.01）I;A61K39/235（2006.01）I;A61K39/23（2006.01）I;A61K39/39（2006.01）I;A61K39/00（2006.01）I;A61K45/06（2006.01）I;A61P33/12（2006.01）I;A61P31/14（2006.01）I;A61P31/20（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 田克恭;李鵬昊;張許科 申請（專利權(quán)）人 普萊柯生物工程股份有限公司
代理機構(gòu) 北京華夏正合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 韓登營
地址 471000河南省洛陽市高新區(qū)凌波路5號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種高效表達外源蛋白的大腸桿菌構(gòu)建方法及其應(yīng)用，其中，所述方法包括：步驟（1）BL21（DE3）lpxM基因的敲除；步驟（2）將tig基因插入步驟（1）得到的BL21（DE3）lpxM基因缺失株；（3）重組載體pET28a?Rcodon的構(gòu)建；（4）外源蛋白基因克隆至步驟（3）得到的重組載體pET28a?Rcodon；（5）將步驟（4）所得重組載體轉(zhuǎn)化步驟（2）得到的菌株；以及步驟（6）外源蛋白的收獲。本發(fā)明方法使得外源蛋白高效表達，能較大腸桿菌常規(guī)表達顯著提高外源蛋白的表達量，內(nèi)毒素含量大大降低，且本發(fā)明方法可應(yīng)用到多種外源蛋白的高效表達，可廣泛適用于真核生物來源的蛋白在內(nèi)的多種獸醫(yī)疫苗蛋白，具有廣泛的適用范圍。