一種快速評估CAR-T細胞體外殺傷效率的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810566144.1 申請日 -
公開（公告）號 CN108753916A 公開（公告）日 2018-11-06
申請公布號 CN108753916A 申請公布日 2018-11-06
分類號 C12Q1/66;C12Q1/06 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄧文海;高基民;錢文斌 申請（專利權(quán)）人 杭州啟瀾生物醫(yī)學技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 杭州求是專利事務所有限公司 代理人 杭州啟瀾生物醫(yī)學技術(shù)有限公司
地址 310000 浙江省杭州市濱江區(qū)長河街道濱安路688號4幢5層503室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種簡單、快速評估CAR?T細胞體外殺傷效率的方法，包括步驟：1)貼壁或懸浮培養(yǎng)腫瘤細胞，其中所述腫瘤細胞為含有CAR?T細胞特異性識別抗原表位并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染熒光素酶基因的腫瘤靶細胞；2)加入CAR?T細胞，獲得CAR?T細胞和腫瘤細胞的混合培養(yǎng)體系；3)離心沉淀所述的混合培養(yǎng)體系中的細胞，培養(yǎng)基重懸細胞后，加入熒光素酶底物，檢測細胞的熒光素酶活力值，記為K；4)設置對照如下：所述培養(yǎng)體系中不加入CAR?T細胞，檢測細胞的熒光素酶活力值為Kmin；培養(yǎng)基中加入細胞裂解液導致最大程度的細胞殺傷，檢測細胞的熒光素酶活力值為Kmax；5)計算CAR?T對腫瘤靶細胞的殺傷效率公式：殺傷效率％＝(Kmin?K)/(Kmin?Kmax)x100％。