一種無內(nèi)毒素質(zhì)粒大量制備工藝

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810034434.1 申請日 -
公開(公告)號 CN108148831A 公開(公告)日 2018-06-12
申請公布號 CN108148831A 申請公布日 2018-06-12
分類號 C12N15/10 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊永坤;孟廣榮 申請(專利權(quán))人 南京馴鹿生物技術(shù)股份有限公司
代理機構(gòu) 蘇州中合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 伍兵
地址 210061 江蘇省南京市江北新區(qū)新錦湖路3-1號中丹科技園D棟10層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體公開了一種無內(nèi)毒素質(zhì)粒的大量提取技術(shù),其特征是包括步驟菌種發(fā)酵、菌體細(xì)胞的收集、菌體的裂解、菌體裂解產(chǎn)物固液分離,收集液體部分和菌體裂解產(chǎn)物液體部分的純化;純化包括添加內(nèi)毒素去除緩沖液,低溫處理和電離層析去除雜質(zhì)和其他質(zhì)粒,收集目標(biāo)質(zhì)粒;所述內(nèi)毒素去除緩沖液pH7.0,包含3?(N?嗎啡啉)丙磺酸,氯化鈉、聚乙二醇辛基苯基醚。該方法不使用動物源性的RNase A和蛋白酶K,以及對人體和動物有毒副作用的苯酚、氯仿;各項指標(biāo)能達(dá)到或接近相關(guān)領(lǐng)域如美國食品和藥品管理局(FDA)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);同時可以線性放大。為真核生物產(chǎn)品的工廠化生產(chǎn)和基因治療產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供了重要的技術(shù)手段。