一種慢病毒制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810034449.8 申請日 -
公開(公告)號 CN108118070A 公開(公告)日 2018-06-05
申請公布號 CN108118070A 申請公布日 2018-06-05
分類號 C12N15/867 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊永坤;趙玖;王玉玉 申請(專利權)人 南京馴鹿生物技術股份有限公司
代理機構(gòu) 蘇州中合知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 代理人 伍兵
地址 210061 江蘇省南京市江北新區(qū)新錦湖路3-1號中丹科技園D棟10層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本申請涉及病毒生物技術領域,具體公開了用于真核細胞轉(zhuǎn)染的慢病毒載體的制備和儲存技術,其包括步驟293T細胞的培養(yǎng)、病毒包裝質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染步驟真核細胞的培養(yǎng)、病毒包裝質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)、收集細胞培養(yǎng)的上清液、上清液的預處理、濃縮純化慢病毒、重懸于病毒緩沖液制劑中冷凍儲存,其轉(zhuǎn)染采用陽離子聚合物法。本發(fā)明的慢病毒載體的制備和儲存技術從病毒制備質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、病毒純化方法以及病毒存儲幾個方面著手,致力于病毒穩(wěn)定性和活性的保持以及提高。本發(fā)明對病毒制劑優(yōu)化后的制劑其病毒穩(wěn)定性明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的制劑,所保存的慢病毒載體在對制劑不同時間不同溫度反復凍融的穩(wěn)定性較為理想,可考慮推廣應用。