一種在液體活檢中檢測(cè)端粒酶活性的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811143040.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN109266726A 公開(kāi)(公告)日 2019-01-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN109266726A 申請(qǐng)公布日 2019-01-25
分類(lèi)號(hào) C12Q1/686;C12Q1/48 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 顧凱強(qiáng);葛遠(yuǎn)龍;李國(guó)慶;楊奇飛;黃洪斌;周君 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 江蘇凱強(qiáng)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京成實(shí)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 江蘇凱強(qiáng)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
地址 226300 江蘇省南通市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)世紀(jì)大道266號(hào)C6樓5層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種在液體活檢中檢測(cè)端粒酶活性的方法,是在篩選癌細(xì)胞完畢后,利用親和素標(biāo)記的磁珠吸附用生物素標(biāo)記已經(jīng)延伸好的產(chǎn)物,從而達(dá)到去除液體中蛋白質(zhì)等其他雜質(zhì)的影響。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的優(yōu)點(diǎn)是:本方法在篩選癌細(xì)胞完畢后,加入1×TRAP體系、生物素標(biāo)記的TS引物、dNTP、RII,利用超聲破碎細(xì)胞后,進(jìn)行30度水浴30分鐘延伸端粒酶,再加入磁珠吸附產(chǎn)物,利用磁力架去除液體,最后加入TRAP PCR反應(yīng)體系,與磁珠一起進(jìn)行PCR反應(yīng)。此方法可以完全去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)的影響,并且親和素標(biāo)記的磁珠與用生物素標(biāo)記目標(biāo)產(chǎn)物有著超高的親和力,可以保證提取的效率。