一種多位點(diǎn)miRNA聯(lián)合檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011415971.4 申請日 -
公開(公告)號 CN112501255A 公開(公告)日 2021-03-16
申請公布號 CN112501255A 申請公布日 2021-03-16
分類號 C12Q1/6816(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙輝;高蕾 申請(專利權(quán))人 昂凱生命科技(蘇州)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州中合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 劉召民
地址 215000江蘇省蘇州市高新區(qū)錦峰路8號醫(yī)療器械產(chǎn)業(yè)園12棟301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種多位點(diǎn)miRNA聯(lián)合檢測方法,包括:1)針對每個目的miRNA序列設(shè)計(jì)合成一對特異性單鏈DNA探針,與相對應(yīng)的待檢測miRNA片段進(jìn)行雜交,形成多個雜化雙鏈;2)使用連接酶將步驟1)形成的雜化雙鏈中的探針連接;3)使用通用引物對步驟2)中產(chǎn)生的連接產(chǎn)物進(jìn)行擴(kuò)增;4)使用特異性磁性微珠對步驟3)產(chǎn)物片段進(jìn)行雜交;5)使用鏈霉親和素標(biāo)記的熒光染料對步驟4)產(chǎn)物進(jìn)行熒光標(biāo)記;6)檢測步驟5)產(chǎn)物熒光信號并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。本發(fā)明的方法無需進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,節(jié)省成本,降低損失;特異性好,可區(qū)分單個堿基;可實(shí)現(xiàn)多重檢測,以及適用于各領(lǐng)域多位點(diǎn)miRNA的定量檢測。??