一種基于等溫擴增的miRNA多位點聯(lián)合檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011405012.4 申請日 -
公開(公告)號 CN112430643A 公開(公告)日 2021-03-02
申請公布號 CN112430643A 申請公布日 2021-03-02
分類號 C12Q1/6844(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙輝;高蕾 申請(專利權(quán))人 昂凱生命科技(蘇州)有限公司
代理機構(gòu) 蘇州中合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 劉召民
地址 215000江蘇省蘇州市高新區(qū)錦峰路8號醫(yī)療器械產(chǎn)業(yè)園12棟301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種基于等溫擴增的miRNA多位點聯(lián)合檢測方法,主要包括以下步驟:1)針對每個目的miRNA序列設(shè)計合成一條特異性單鏈DNA探針,鎖式探針與相對應(yīng)的待檢測miRNA片段進行雜交,形成多個雜化雙鏈;2)連接步驟1)雜交成功的鎖式探針的兩端;3)對步驟2)連接產(chǎn)物進行滾環(huán)等溫擴增;4)使用特異性磁珠對步驟3)產(chǎn)物片段進行雜交;5)使用鏈霉親和標(biāo)記的熒光染料對步驟4)產(chǎn)物進行熒光標(biāo)記;6)檢測步驟5)產(chǎn)物熒光信號。本發(fā)明無需進行逆轉(zhuǎn)錄,節(jié)省成本,降低損失;特異性好,可區(qū)分單個堿基;多重檢測;可應(yīng)用于各領(lǐng)域多位點miRNA的定量檢測,包括但不限于癌癥篩查、疾病診斷、科學(xué)研究等。??