一種用于檢測(cè)基因突變的長(zhǎng)度依賴探針制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410363255.4 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN104099424A 公開（公告）日 2014-10-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN104099424A 申請(qǐng)公布日 2014-10-15
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 何駿奇;毛丹丹;王校;卞雪蓮 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海中優(yōu)醫(yī)藥高科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 200433 上海市楊浦區(qū)國(guó)泰路11號(hào)705-706室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于檢測(cè)基因突變的長(zhǎng)度依賴探針的制備方法，包括以下步驟：1）選擇與待測(cè)目標(biāo)序列無關(guān)的載體作為模板，并根據(jù)目標(biāo)核苷酸序列和無關(guān)序列設(shè)計(jì)長(zhǎng)度一代探針對(duì)的擴(kuò)增引物序列；2）人工合成引物；3）PCR擴(kuò)增；4）PCR產(chǎn)物純化回收；5）使用T7外切酶對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行消化；6）回收ssDNA。本發(fā)明所述MLPA探針制備方法成本低廉，只需要PCR儀即可完成擴(kuò)增、酶切等全部操作，利用T7外切酶消化排除了沒有消化完全的dsDNA和核苷酸，提高了探針制備效率，提高M(jìn)LPA實(shí)驗(yàn)時(shí)的雜交效率。