一種停滯棒桿菌的高效轉(zhuǎn)化方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011389348.6 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN112430561A | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-03-02 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112430561A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-03-02 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12R1/15(2006.01)N;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/77(2006.01)I | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 蔡友華;鄭穗平;謝瑩玉;趙楠楠;謝學(xué)敏;余宇堅(jiān) | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 廣州粵高專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 | 代理人 | 楊利娟 |
| 地址 | 526040廣東省肇慶市端州區(qū)工農(nóng)北路67號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種適用于停滯棒桿菌的高效轉(zhuǎn)化方法。其轉(zhuǎn)化方法重點(diǎn)對(duì)停滯棒桿菌電轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化，通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基、電場(chǎng)強(qiáng)度等因素的系統(tǒng)優(yōu)化，提高轉(zhuǎn)化效率，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)停滯棒桿菌基因組的編輯，達(dá)到構(gòu)建目標(biāo)工程菌的目的?？刂破鹗脊饷芏戎礝D 600nm參數(shù)為0.29～0.31，將上述種子液轉(zhuǎn)接入優(yōu)化后的感受態(tài)培養(yǎng)基中，在31～32℃，249～252rpm培養(yǎng)，使OD 600nm參數(shù)達(dá)到0.7～1.1；當(dāng)OD600nm值為0.7～1.1的感受態(tài)細(xì)胞，1μg的質(zhì)粒用量，6min的冰浴時(shí)間，10％甘油、1.8KV、5ms、連續(xù)電擊3次，恢復(fù)時(shí)間為3h組合的轉(zhuǎn)化效率最高，達(dá)到了331cfu/μg。本發(fā)明的停滯棒桿菌的高效轉(zhuǎn)化方法操作簡(jiǎn)單，轉(zhuǎn)化率高。?? |
