一種基因編輯單細胞的快速篩選方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110845483.5 申請日 -
公開（公告）號 CN113584127A 公開（公告）日 2021-11-02
申請公布號 CN113584127A 申請公布日 2021-11-02
分類號 C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/686（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 石宏;邱志超;翟平生 申請（專利權(quán)）人 云南聚云基因工程有限公司
代理機構(gòu) 北京酷愛智慧知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 劉志剛
地址 650106云南省昆明市高新區(qū)科高路新光巷285號沃霖大廈第七層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基因編輯單細胞的快速篩選方法，包括將單一細胞于96孔細胞培養(yǎng)板中進行擴大培養(yǎng)后，取出部分細胞懸液置于96孔PCR板中；將96孔PCR板進行密封、離心、靜置、再離心，采用96孔吸液板吸去上清液；在去除上清液的96孔PCR板中加入PH為8.0的1xTE buffer緩沖液，密封96孔PCR板后，于95℃下處理8～12min，再進行離心處理，收集上清，即得細胞基因組DNA；以細胞基因組DNA為模板擴增包含基因編輯位點的基因片段，再進行測序，根據(jù)測序結(jié)果確認基因編輯的單細胞；該方法將96孔培養(yǎng)板中的細胞一一對應(yīng)96孔PCR板，再經(jīng)DNA提取后直接進行PCR擴增，該方法操作簡單、省時省力，并且避免了人為編板號錯誤的問題。