L-色氨酸產量提高的重組大腸桿菌及其構建方法與應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010033337.8 申請日 -
公開（公告）號 CN111154706B 公開（公告）日 2021-05-11
申請公布號 CN111154706B 申請公布日 2021-05-11
分類號 C12N1/21;C12N15/70;C12N15/54;C12N15/66;C12P13/22;C12R1/19 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉龍;周人楷;翟秀超;陳泰馳;呂雪芹;李江華;堵國成 申請（專利權）人 無錫中糧工程科技有限公司
代理機構 蘇州市中南偉業(yè)知識產權代理事務所（普通合伙） 代理人 王玉仙
地址 214100 江蘇省無錫市濱湖區(qū)蠡湖大道1800號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種L?色氨酸產量提高的重組大腸桿菌及其構建方法與應用。本發(fā)明是以大腸桿菌CICC10303作為出發(fā)菌株，采用易錯PCR和CRISPR?Cas9基因編輯技術，敲除關鍵基因trpR解除了色氨酸合成和轉運關鍵酶受到的反饋阻遏調控，敲除預苯脫氫酶編碼基因pheA后解除苯丙氨酸合成途徑的競爭后，利用基因隨機突變試劑盒隨機突變L?色氨酸合成相關基因aroK的啟動子序列ParoK，構建得到5株重組菌ECTR1、ECTR2、ECTR3?1～ECTR3?3，其中ECTR3?2使得L?色氨酸的發(fā)酵罐產量得到了顯著提高，達到了40g/l，為進一步代謝工程改造大腸桿菌生產L?色氨酸奠定了基礎。