一種辣椒CRISPR-Cas9基因編輯方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910169731.1 申請日 -
公開（公告）號 CN109722446B 公開（公告）日 2022-05-31
申請公布號 CN109722446B 申請公布日 2022-05-31
分類號 C12N15/82（2006.01）I;A01H5/00（2018.01）I;A01H5/10（2018.01）I;A01H6/82（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 孫國勝;張昌偉;馬志虎;許可翠;戴忠良 申請（專利權(quán)）人 江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所
代理機(jī)構(gòu) 南京申云知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 -
地址 212400江蘇省鎮(zhèn)江市句容市華陽鎮(zhèn)弘景路1號江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種辣椒CRISPR/Cas9基因編輯方法及應(yīng)用，屬于基因編輯技術(shù)領(lǐng)域。首先設(shè)計sgRNA引物MMD1CaCRISPR?Cas9?F和MMD1CaCRISPR?Cas9?R，構(gòu)建辣椒基因編輯載體；利用植物花粉納米磁轉(zhuǎn)化技術(shù)介導(dǎo)轉(zhuǎn)化，實現(xiàn)對辣椒的基因編輯。本發(fā)明首次在辣椒中使用植物花粉納米磁轉(zhuǎn)化技術(shù)作為基因編輯的轉(zhuǎn)化方法，并通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)獲得單基因敲除突變植株，突變率達(dá)到60％；為后續(xù)多基因敲除，基因片段插入、替換等奠定技術(shù)基礎(chǔ)。