一種提高線性多肽生物表達(dá)的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN202210179008.3 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN114539425A | 公開(公告)日 | 2022-05-27 |
申請公布號 | CN114539425A | 申請公布日 | 2022-05-27 |
分類號 | C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I | 分類 | 有機(jī)化學(xué)〔2〕; |
發(fā)明人 | 苗林;鄒升;潘明娜;王芹芹;王新波;李義龍;劉文革;劉惠清;李向群 | 申請(專利權(quán))人 | 湖南中晟全肽生化有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 江蘇圣典律師事務(wù)所 | 代理人 | - |
地址 | 412000湖南省株洲市云龍示范區(qū)云龍大道1769號現(xiàn)代服務(wù)業(yè)總部園5號棟 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種提高線性多肽生物表達(dá)的方法,將EDDIE(C69E、C168E)?Sumo聯(lián)合標(biāo)簽與目標(biāo)多肽融合表達(dá),得到融合蛋白;將所述融合蛋白復(fù)性;采用與所述聯(lián)合標(biāo)簽相適應(yīng)的特異蛋白酶切除復(fù)性后融合蛋白中的Sumo標(biāo)簽,即能提高線性多肽生物表達(dá)。本發(fā)明結(jié)合EDDIE和SUMO蛋白兩種標(biāo)簽的優(yōu)點(diǎn),首次利用EDDIE(C69E、C168E)加SUMO聯(lián)合標(biāo)簽在C端融合目的多肽,并利用SUMO蛋白酶切除標(biāo)簽,采用固相萃取小柱C8反相柱純化酶切產(chǎn)物,獲得多肽,以此建立大腸桿菌高效表達(dá)系統(tǒng),從而得到高表達(dá)、高純度的目的多肽,主要用于線性多肽的生物合成,具有產(chǎn)量高、成本低、易于純化的優(yōu)點(diǎn)。 |
